1概述

蔬菜中含有较多的硝酸盐，在硝酸盐还原酶作用下硝酸盐可能产生大量的亚硝酸盐，对人产生毒害作用。随着分析化学新方法和新技术的不断出现和发展，食品中亚硝酸盐的检测也更加多元化，新的检测方法层出不穷，常见方法有Ⅱ玛：a光度法．b示波极谱法．c．荧光法；d．离子色谱法揖催化动力学法、气相色谱法以及各种传感器技术等。我国的国标方法为离子色谱法和格里斯试剂比色法。但是离子色谱尚未在中国普及，而且耗材较贵，严重影响色谱法在硝酸盐和亚硝酸盐分析中应用。本实验利用高效液相色谱法对蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐的含量进行检测，利用亲水色谱柱ZIC—HILIC作为实验的色谱柱，分别采用不同浓度的甲酸胺和醋酸铵作为流动相，紫外检测器于204nm条件下检测亚硝酸盐的含量，通过改变不同流动相的浓度以及pH来确定最佳的方法，前处理约40min，整个分离过程应少于5min，达到高效分析的目的。

2材料与方法

2．1材料与仪器设备。

水为超纯水，硝酸钾、亚硝酸钠、甲酸铵、乙酸铵、甲酸、冰乙酸(国药集团化学试剂有限公司)，甲醇和乙腈(Merck)。高效液相色j割义：1100，Agilent，配紫外检测器。均质仪：MIXERB一400，Buchi。超声波清洗仪：KQ3200B，昆山市超声波仪器有限公司，250W，40KHzopH计：FE20，梅特勒一托利多仪器有限公司。

2．2样品前处理。

使用MIXERB一400均质仪将黄瓜样品粉碎均质。准确称取匀浆5．00g，加人80ml纯水，40~C超声提取30rain，每隔5min震荡1次，提取后取出放置至室温，加水稀释至刻度。溶液经滤纸过滤后，取部分溶液于10000转／分钟离心15rain，取上清液lml使用乙腈定容至10ml，取定容液过0．22in四氟乙烯滤膜后上机检测。

2．3色谱条件。

色谱柱ZIC—HILIC(MERcK)l00mm×2．1ram，3．5m，流速0．3m]lmin，柱温30℃，紫外检测器波长204nm，流动相为20mtoolpH=4．0乙酸铵，90％乙腈等度洗脱。

3结果与讨论

3.1试样提取方法的选择。

为了确定较优的亚硝酸盐和硝酸盐提取温度和时间，本实验对提取时间和温度进行优化。准确称取黄瓜匀浆5．00以80ml超纯水洗入100容量瓶中，分别选用30％、40oC、50℃和60~(i进行超声水浴提取，超声功率250W，频率40KHz，提取时间为2O、3O、4O和50rain。试验结果表明，在同一提取温度条件下随着提取时间的延长，亚硝酸盐提取率呈现先提高再下降的趋势，在4o℃超声提取30min即可获得最高的提取率，因此选择40℃超声提取30min为本研究的提取条件。