概述

在给化验工培训测定水中氨氮指标时，使用科学计算器对氨氮数据处理，化验工理解困难，而且手工制作校准曲线复杂繁锁误差大。经过对纳氏试剂分光光度法工作原理分析，如果改用EXCELL软件来制作校准曲线，并用EXCELL软件计算氨氮含量。氨氮的测定：纳氏比色法，纳氏试剂光度法测定氨氮。

1原理

碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应生成淡红棕色胶态化合物，此颜色在较宽的波长范围内具强烈吸收。通常测量用波长在410~425nm范围。

2仪器

754分光光度计、20mm比色皿、10ml移液管、50ml移液管。

3步骤

3.1制作氨氮测定的校准曲线

用移液管分别移取0.00、0.50、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00和10.0ml氨氮标准工作液，入50ml比色管中，用去离子水稀释至标线。然后分别加入1.0ml酒石酸钾钠溶液，摇匀后再加1.5ml纳氏试剂，继续摇匀。等反应彻底完成（大概10min）后，将这八支比色管里的已经充分反应完成的溶液依次加入20mm比色皿，可见分光光度计波长必须调到425nm处，然后依次测量这八支比色管氨氮标准工作液的吸光度。注意用EXCELL表格及时记下氨氮标准工作液的吸光度实验数据。用EXCELL表格里的插入散点图（仅带标记的散点图）绘制氨氮标准工作液校准曲线。氨氮含量（mg）为横坐标，吸光度为纵坐标。

3.2测定样品

去出水检测间取出水样500ml，倒入100ml烧杯中，用移液管吸取50ml水样入50ml比色管至标线，按上述步骤加指示剂试剂。放置10min后，按照标准溶液校准曲线步骤测量水样的吸光度。将实验数据及时输入电脑EXCELL中。