胰腺癌是恶性程度极高、发病隐匿、生存率极低的消化道肿瘤，其中位生存期仅5个月，5年生存率约为5%。

目前，外科手术切除是治疗胰腺癌疗效确切的一种手段，然而>80%的患者就诊时已是晚期或出现转移而无法进行手术切除。针对胰腺癌的靶向治疗也一直没有突破性进展。化疗是不可切除的局部胰腺癌进展期或转移性胰腺癌治疗的重要辅助手段，但其临床有效率低。二联或三联疗法虽取得了一定疗效，但研究显示其毒性也有所增加。

关于癌症治疗，中西医结合的多学科综合治疗中很多方法均被证明优于单纯的西医治疗。面对上述困境，探索中药的化疗辅助治疗是一个新的方向。仙鹤草有收敛止血、截疟、止痢、解毒等功效，临床上多用于治疗咳血、止血、疟疾、脱力劳伤和痈肿等症。现代中医药研究发现，仙鹤草还具有较强的抗肿瘤功效。

有学者用前列腺癌细胞株PC-3建立前列腺癌实体移植瘤动物模型，发现仙鹤草对前列腺实体性移植瘤有显著的治疗效果。很多体外细胞实验也显示，仙鹤草能够抑制食管癌、胃癌、宫颈癌、肺癌和肝癌细胞株的增殖生长，诱导肝癌细胞凋亡。但鲜有学者在胰腺癌方面进行仙鹤草的实验论证。本实验拟通过探讨仙鹤草水提液对多种胰腺癌细胞增殖的抑制作用，为仙鹤草水提液的抗胰腺癌作用提供实验依据。

1仪器与试剂

1.1仪器

101-3AB电热鼓风恒温干燥箱(天津市赛得利斯)；N1100型EYELA旋转蒸发仪(东京理化)；SHB-Ⅲ型循环式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司)；3111型5%CO2培养箱(美国ThermoFisher)；SW-CJ-1FD型超净工作台(苏净安泰)；SpectraMaxM3酶标仪(美国MolecularDevices)；AttuneNxT流式细胞仪(美国ThermoFisher)。

1.2试剂

0.25%胰酶(吉诺生物医药技术有限公司，批号：15051501)；改良型RPMI-1640培养基(赛默飞世尔生物化学制品有限公司，批号：NAD1384)；PBS(赛默飞世尔生物化学制品有限公司，批号NAC1348)；胎牛血清(浙江天杭生物科技有限公司，批号：150214)；双抗(Sigma，批号：J140521)；SRB(Sigma，批号：MKBQ1665)；TAC(上海凌峰化学试剂有限公司，批号20141209)；Tris-Base(Ameresco，批号：0497)；仙鹤草(杭州凯仑医药股份有限公司中药饮片厂，批号：160723)；注射用盐酸吉西他滨(江苏豪森药业有限公司，批号：160901；规格：每瓶200mg)；所有细胞购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库，BXPC-3人原位胰腺腺癌细胞(目录号：TCHu12)，PANC-1人胰腺癌细胞(目录号：TCHu98)。

2方法

2.1仙鹤草水提液的制取

称取干燥仙鹤草99.68g，加纯净水1000mL，浸0.5h后加热回流2次，一提、二提回流时间均为2h，而后合并2次提取液至60℃旋转蒸发仪，浓缩至体积为101.9mL，将此浓缩药液经滤纸减压过滤，再用直径为0.22µm的微孔滤膜正压过滤除菌，所得药液为原液，生药含量为0.9782g·mL-1，药物分装置于-20℃冷冻保存。