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近些年来,抗生素大量应用于医疗、家庭用药以及养殖等行业,但是在使人们受益的同时也给健康与环境带来了威胁与危害。如今,抗生素已经被视为一种新的污染物,其环境残留污染问题也已引起了研究人员的极大关注。不过,由于在环境中残留的抗生素浓度较低,给检测带来极大困难,因此当前我们急需重视的是对于抗生素检测分析技术的研究。
在水环境中,抗生素的残留浓度大致处于ng/L~µg/L水平,在土壤和污泥等环境中的残留浓度处于µg/kg~mg/kg水平,这些残留均属于痕量、微量水平,因此需要相应高灵敏度的检测仪器对其进行分析检测以得到精确的结果。发展抗生素检测分析技术,对于减少环境污染,促进人类健康,以及推动相关领域的研究都有至关重要的意义。
1抗生素检测技术概述
检测抗生素比较常用的是理化检测方法,抗生素分子中存在不同的官能团,这些官能团具有某些特殊反应或特定性质,我们就可以根据这些官能团来测定抗生素的含量。理化检测方法有高效液相色谱法(HPLC)、薄层色谱法(TLC)、气相色谱法(GC)、质谱法(MS)以及联用技术等,联用技术主要有GC-MS、TLC-MS、LC-MS、LC-NMR和SFC-MC等。这些方法对于抗生素的定性和定量分析灵敏度较高,但缺点是仪器设备比较昂贵,而且前处理复杂繁琐,对技术人员要求较高,分析周期长,并且只适用于单个样本的检测。
抗生素的微生物检测法是根据抗生素对某些微生物的生理机能或者代谢等产生的抑制效果,来定性或定量检测样品中残留的抗生素。这种传统的检测方法所需费用低,一般实验室都可以操作。缺点是测定周期比较长,而且需要通过肉眼判断试验结果,因此容易产生误差,操作较为复杂,对微量残留效果较差。酶联免疫吸附法(ELISA)是近几来发展起来的一种抗生素检测方法,它的原理是灵敏度高的抗体-抗原反应的生物分析,是根据抗原和抗体的特异反应将待测物与酶连接起来,并通过酶与底物发生颜色反应。这种检测方法操作和前处理简单、成本低、快捷灵敏,无需昂贵的仪器,还可同时测定多个样品。不过这种检测方法也有很多不足,比如对试剂的选择性高,难以同时分析多种成分,对于结构相似的化合物有一定程度的交叉反应,对小分子化合物或不稳定化合物的分析也有一定困难。
2抗生素检测技术研究进展
高效液相色谱(HPLC)和液质联用技术(HPLC-MS)是最常用的抗生素检测方法。它采用色谱分离理论对待测物质进行检测分析,具有分离速度快、效率高和操作自动化等优点。这种方法需要将试样制成溶液,但不需要气化,所以不受试样挥发性的限制,能够很好地用于沸点高、热稳定性差、相对分子质量比较大的有机物的分离检测,而且能根据试样需求来选用不同种类的检测器,比如质谱仪(MS)、紫外吸收检测器(UV)及荧光检测器等。质谱分析灵敏度高、分析速度快、样品用量少,而且分离和鉴定同时进行,应用广泛。将色谱分离技术,如气相、液相与质谱法相结合可以解决许多分析问题。
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