国家标准GB／T5009．28—2003只规定了汽水、果汁、酒类中糖精钠的检测方法，并未规定乳制品的检测方法。乳制品中蛋白质含量较高，因此前处理的关键是沉淀蛋白。蛋白在水溶液中以胶体形式存在，常规的沉淀蛋白的方法有金属盐沉淀、有机溶剂沉淀、有机酸沉淀。金属盐析(亚铁氰化钾一乙酸锌法、乙酸铅一草酸钾磷酸氢二钾法)中和蛋白表面电荷和使蛋白质变性，从而使蛋白质聚集沉淀。

有机溶剂沉淀(无水乙醇法)破坏蛋白质胶体的水化膜使蛋白质沉淀。有机酸(三氯乙酸法)可与蛋白质结合成不溶性的盐沉淀。在查阅大量文献并结合多年基层工作经验的基础上，本研究对4种前处理方法及不同的离心速度进行试验比较及优化。

1材料与方法

1．1仪器和试剂

1．1．1ThermoFisherScientific液相色谱仪u3000(二极管阵列检测器)；离心机(ThermoFisherMicro21)；色谱柱(SynctonisC18250inlnx4．6mm)；飞达抽滤器；针式过滤器(Anpel水相有机相13inlnx0．22pan)。

1．1．2糖精钠(国家标物中心GBW(E)10008)；乙酸铵(GR级)；甲醇(色谱纯)；亚铁氰化钾(GR级)；乙酸锌(GR级)；乙酸铅(GR级)；草酸钾(GR级)；磷酸氢二钾(GR级)；无水乙醇(GR级)；三氯乙酸(GR级)。

1．2色谱条件

淋洗液：甲醇：0．02mol／L乙酸铵(5：95)；流速1．0ml／min；波长230nm；进样量10Ixl；柱温30℃。

1．3样品前处理

1．3．1亚铁氰化钾一乙酸锌沉淀法取样10．0g，加入亚铁氰化钾(210g／L)、乙酸锌(106g／L)各5ml加水定容至50ml。充分混匀，静置10min。

1．3．2乙酸铅一草酸钾磷酸氢二钾沉淀法称取样品10．0g，加入乙酸铅(200g／L)4ml，草酸钾一磷酸氢二钾(草酸钾30g／L，磷酸氢二钾70g／L)4m1，加水定容至50ml。充分混匀，静置10min。

1．3．3无水乙醇沉淀法称取样品10．0g，用无水乙醇定容至50ml。充分混匀，静置10min。

1．3．4三氯乙酸沉淀法称取样品10．0g，取50mmol／L的三氯乙酸5m1定容至50ml。充分混匀，静置10min。分别取上述处理方法得到上清1．5ml于离心管中，分别以4500r／min及12000r／min转速离心10min。取上清过0．22m滤膜。

1．4标准曲线的制备

配制糖精钠标准系列，浓度分别为：0mg／L、10mg／L、20mg／L、40mg／L、80mg／L、100mg／L。

1．5精密度、回收率试验

对同一个空白样品加入20mg／L标准物质溶液重复测定6次，计算检测结果的相对标准偏差。用同一空白样品分别加入10mg／L、20mg／L、40mg／L标准物质溶液，每个样品重复3次取平均值计算回收率。