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急性胰腺炎(AP)是消化系统常见的急性炎症性疾病,重症急性胰腺炎(SAP)患者常并发多器官功能障碍,病死率高达36%~50%”。研究表明,AP患者早期存在促炎因子、抗炎因子的失衡,SAP患者可出现严重失控的炎症反应,甚至导致多器官功能衰竭。
NF-kB作为一种重要的核转录调节因子,参与AP炎症递质的瀑布样级联反应,在炎症反应的放大和维持方面起着核心作用,而抑制其活性可以明显减轻AP的严重程度。积雪草苷(asiaticoside,AS)是-种从伞形科植物积雪草中提取出的三萜类化合物,具有抗炎、抗氧化、促进伤口愈合、抗肿瘤等广泛的生物学作用。有研究表明,AS通过抑制NF-KB活性,降低血浆中促炎因子IL-6JIL-1β和TNF-a的水平,增加抗炎因子1L-10的水平,减轻炎症细胞浸润,具有明显的抗炎作用。
近年来人们对AS治疗多种疾病的研究越来越多,但其对AP的作用尚未见相关报道。本研究采用腹腔注射AS治疗急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠,探讨其可能机制。
清洁级雄性SD大鼠54只,体重180~200g,购于.上海SLAC实验动物有限公司,适应性饲养1周。实验前禁食过夜,自由饮水。按随机表法将大鼠分为对照组(9只)、ANP组(15只)、低剂量AS(LAS)组(15只)、高剂量AS(HAS)组(15只)。采用胰胆管内逆行注射4%牛磺胆酸钠(100g/0.1ml,Sigma公司)方法制备大鼠ANP模型。高、低剂量AS干预组大鼠在造模前分别腹腔注射AS25、50mg/kg体重,AS(AS纯度>98%)购于上海TautoBiotech有限公司;对照组及ANP组腹腔注射等容积生理盐水。造模后12.24、48h分批处死大鼠,经心脏穿刺采血,离心分离血清,置-20保存。快速取出胰腺组织,部分置4%中性甲醛液固定,部分立即置液氮冷冻后转移至-70C冰箱保存。
采用全自动生物化学分析仪测定血清淀粉酶、脂肪酶活性;采用双抗体夹心ELISA法测定血清1L-1β、1L-6和TNF-a水平,ELISA试剂盒购于美国R&D公司,严格按试剂盒说明书操作。
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