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日落黄褪色光度法检测H2O2-Fe(Ⅱ)羟自由基

大C-会员头像-www.bzwz.com标准物质网 大C 0 308 2021-09-07
【摘要】利用Fenton反应中加色素日落黄(FCF),产生的羟自由基(OH)氧化日落黄发生减色效应。加入抑制OH的还原剂,测定日落黄吸光度的变化间接测定羟自由基的产生量。实验对抗坏血酸,盐酸羟胺在不同溶剂中的抗羟基自由基氧化性能进行了比较。结果表明:抗坏血酸、盐酸羟胺50%乙醇溶液的抗氧化能力较抗坏血酸、盐酸羟胺水溶液的抗氧化能力强。4种体系中的回收率分别为:抗坏血酸107.2%、盐酸羟胺50%乙醇溶液104.2%,抗坏血酸90.2%、盐酸羟胺水溶液96.0%。
  • 随着人们对自由基研究的日渐深入,发现损害人体健康的自由基几乎都与活性氧自由基有关,它对人体的损害本质是一种氧化过程,·OH氧化性强,易与蛋白、糖和氨基酸等进行反应,损伤细胞,引发各种疾病。对其的检测和抑制一直以来都受到人们的关注。文章利用Fenton反应中加色素日落黄(FCF),产生的羟自由基(·OH)氧化日落黄发生减色效应。加入抑制·OH的还原剂,测定日落黄吸光度的变化间接测定羟自由基的产生量。对抗坏血酸,盐酸羟胺在不同溶剂中的抗羟基自由基氧化性能进行了比较,为羟自由基(·OH)的检测,药剂的选择提供科学依据。

    1试验部分

    1.1仪器与试剂

    TU一1901双光束紫外可见分光光度计(北京普析通用有限责任公司);HH—S恒温水浴锅(金坛市恒丰仪器厂);722s可见分光光度计(美国VARIAN公司);pHS一2ST数显酸度计(上海天达仪器有限公司);XS电子天平(瑞士普利赛斯)。日落黄(天津多福源实业有限公司):配制O.3mmlo/L的的溶液;H:0:(体积分数30%,使用时适当稀释);3.8mmol/LEDTA—Fe(II)溶液;三酸缓冲溶液;抗氧化剂溶液:抗坏血酸和盐酸羟胺分别配成1.0mg/mL的溶液;所用试剂均为分析纯。

    1.2试验方法

    10mL比色管中,顺次加3mL三酸缓冲溶液(pH=2.00),3.8mmol/LEDTA—Fe(II)溶液0.7mL,2.0mL0.3mmol/L日落黄标准溶液,0.6%H:O:溶液0.7mL,蒸馏水定容且30℃水浴中恒温30min,722S分光光度计上测A~-480nm处的吸光度A伽。H2O:加入前FCF溶液的吸光度为A0,H:0:加入后的吸光度为A,吸光度的变化△A;A。A来表示·OH的产生量。

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