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丁香叶为木樨科植物紫丁香(SyringaoblateLind1.)、洋丁香(S.vulgarisL.)或朝鲜丁香(S.dalatataNakai)的干燥叶,其味苦,性寒,归肺、胃经,具有清热解毒、消炎止痢、利湿退黄之功效。《新华本草纲要》中记载其主治“急性黄疽型肝炎,外用抗菌,爆发性火眼,多种疮疡肿毒”。《长自山植物药志》也有其“治腹泻、肝炎”的记载。丁香叶在民间被用作“抗菌消炎、清肝利胆”的良药,用其水煎液治疗暴火眼和防治痢疾非常普遍。
丁香叶所含主要化学成分为有机酸类、苷类、挥发油等成分。有机酚酸类成分(丹酚酸、迷迭香酸、原儿茶酸、咖啡酸、丹参素等)主要为水溶性,其总酚酸的消炎、抗菌、抗病毒、增强免疫力作用确切。其中,原儿茶酸、咖啡酸具有一定代表性。本实验采用水提醇沉法提取总酚酸,优选丁香叶中总酚酸最佳水提取乙醇沉降工艺。
Agilent1100高效液相色谱仪(包括四元梯度泵,在线脱气机,VWD检测器),2140型电子分析天平,METTLERAB135一S十万分之一电子天平(瑞士),RE一520旋转蒸发器。
原儿茶酸对照品(批号110809—200503,纯度≥98.5%,中国药品生物制品检定所);咖啡酸对照品(批号110885—200102,纯度≥98.5%,中国药品生物制品检定所);丁香叶购于毫州市远光饮片厂,并经辽宁中医药大学李峰教授鉴定为紫丁香的干燥叶。乙腈、磷酸为色谱纯,其他试剂均为分析纯,水为娃哈哈纯净水。
精密称定对照品原儿茶酸、咖啡酸适量,加甲醇制成质量浓度分别为0.1840、0.01756mg/mL的对照品溶液,备用。
水提取供试品溶液制备:取丁香叶9份,每份30g,精密称定,置圆底烧瓶中,冷浸30min,再按照正交试验表设定方法分别制备,过滤,浓缩至250mL量瓶,备用。醇沉淀供试品溶液制备:精密称定100g丁香叶,按水提取的最优工艺提取,制备水提取液,取1/10量,按照醇沉正交试验表设计进行醇沉,过滤,挥干乙醇,容至50mL量瓶,备用。
DismonsilCR柱(200mmx4.6n'lm,5m),以乙腈一1%磷酸7h(10:90)为流动相,流速为0.5mL/min,检测波长采用程序控制:0~25rain,258nm;25-45min,323nm,柱温为30℃。
精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20L,注入液相色谱仪,按色谱条件依法进样测定,计算原儿茶酸和咖啡酸的含量。
分别将水提和醇沉所得的供试品溶液测定出膏率。
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