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丁香叶为木樨科(Oleaceae)丁香属(Syringa)紫丁香的干燥叶片。我国是丁香的栽培起源中心,种质资源丰富,丁香属植物约有32种,我国产27种,其中特有种22种,而欧洲仅产2种,亚洲其它国家和地区(如日本、朝鲜、尼泊尔、巴基斯坦、阿富汗等)产4种,美洲则完全没有。
药用价值早为民间所认知,其水煎剂用于治疗暴火眼和痢疾。丁香叶大量研究发现,其具有抗菌、抗病毒、清热、燥湿、抗氧化、解毒、消炎和麻醉等作用。通过对丁香叶化学成分进行研究发现,丁香叶含有多种活性成分,例如:有机酸类、挥发油、总黄酮、总酚酸和总皂苷等成分。而目前对于丁香叶成分研究主要集中在前几种物质上,对总皂苷的研究较少。皂苷类物质具有抗菌、抗氧化、免疫系统的双向调节、抗疲劳、抗癌、降血糖、抗艾滋病毒等药物活性,此外总皂苷还可以用于高级化妆品、化工原料和食品添加剂中。丁香叶中含有丰富的皂苷类物质,而且与丁香叶的多种活性功能有关。
为了使丁香叶更广泛的应用于功能性食品的开发,本实验在原有丁香叶总皂苷提取丁艺研究基础上,采用响应面(responsesurfacemethodology,RSM)分析,丁香叶总皂苷的提取方法进行优化,优选出丁香叶总皂苷最佳提取方法和工艺,旨为丁香叶的综合开发利用提供一定理论参考。
丁香叶采自东北农业大学校园内,经黑龙江省中医药大学李彦冰教授鉴定为丁香叶,采收期为2013年9月;齐墩果酸标准品上海金穗生物科技有限公司(纯度≥98%);乙醇等试剂均为分析纯试剂。UV一8000A紫外分光光度计上海市元析仪器有限公司;DH6000A电热恒温水浴锅天津市泰斯特仪器有限公司;CPA225D分析天平赛多利斯科学仪器(北京)有限公司;KQ3200E型超声波清洗器昆山市超声仪器有限公司。
提取将丁香叶叶片打碎,粗粉粒径过药筛,不过药筛,称取丁香叶粗粉5.0g,置250mL圆底烧瓶中,乙醇回流法提取,提取液抽滤后,合并提取液,采用旋转蒸发仪浓缩,定容至100mL容量瓶中,备用。
精密称取干燥至恒重的齐墩果酸标准品11.04mg置于25mL容量瓶中,加入甲醇5mL,超声处理5rain,用甲醇定容至刻度,其浓度为0.44mg/mL,以其作为标准品储备液。吸取齐墩果酸标准品溶液0.05mL及供试品溶液1mL于10mL具塞试管中,水浴挥干溶剂,精密加入新配制的5%香草醛一冰乙酸溶液0.2mL,高氯酸0.8mL,加塞,摇匀,于60-65℃水浴中加热15rain,取出,流水冷却至室温后,加入冰乙酸5mL,摇匀,在450~900am波长范围内扫描。确定测定波长。
精密吸取齐墩果酸对照品溶液0.10、0.15、0.20、0.25、0.30mL分别加入5支具塞试管中,即各试管中标准品浓度分别为0.044、0.066、0.088、0.110、0.132mg/mL,按照“1.2.2”项下操作,测定吸光度。
分别考察乙醇浓度、液料比、提取温度、提取时间和提取次数5个因子对丁香叶总皂苷提取率的影响。
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