为了使测量数据的处理、测量结果的表达以及测量结果的质量评定等方面更准确、更科学，根据中国实验室国家认可委员会对认可实验室在测量不确定度方面的要求，对HPLC法测定青霉素V钾片含量的不确定度进行了测量和评估，从而找出影响不确定度的因素，为检验报告提供科学依据，使实验的结果数据更准确，实验结论更确定。下面介绍了该评估方法及结果。

1测定过程

1．1色谱条件与系统适用性试验

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以水．乙腈一冰醋酸(65：35：1)为流动相，检测波长为268nm。

1．2对照品溶液的制备

精密称取青霉素V对照品(Mo)50．98mg和50．12mg，分别置50mL量瓶中(V。)，用pH6．5的磷酸盐缓冲液(取O．2mol·L。1磷酸二氢钾溶液125mL，加水250mL，混匀，用氢氧化钠试液调节pH值至6．5，再用水稀释至500mL)溶解并稀释至刻度。本实验所用试剂水均为超纯水。环境条件：温度：20℃；湿度：50％。

1．3供试品溶液的制备

精密称取供试品(M。)54．23mg和53．89mg，分别置50mL量瓶中(V。)，用pH6．5的磷酸盐缓冲液溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

1．4测定方法与数据

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20，注入液相色谱仪，测得对照品溶液的峰面积为(A₀)，供试品溶液的峰面积为(A_x)。由计算公式：平均标示含量=(A。M。V，×含量对×平均装量M，)／(A₀V₀M_x×标示量)×100％，计算得青霉素V(c。6H18N205S)的含量为：89．0％。见表1。