1仪器、试药与试剂

1．1仪器

Aglient1100型全自动进样色谱仪，DAD检测器，Aglient化学色谱工作站。

1．2试药

青霉素V钾对照品；青霉素V钾分散片(0．25g)。试剂：水为重蒸馏水，乙腈为色谱纯，磷酸二氢钾为分析纯。

2试验方法与结果

2．1色谱条件

色谱柱：HypersilODS柱(5·250mm×4．6mm)。流动相：乙腈-0．04mol／L磷酸二氢胺钾溶液(三乙胺调pH至6．5)(25：75)检测波长：268nm；流速：1．0ml／min：柱温：25℃；进样量：10μl。

2．2线性关系

精密称取青霉素V钾对照品125mg，置25ml量瓶中，加流动相溶解并分别释至刻度，摇匀，作为储备液。分别精密量取储备液适量，用流动相制成浓度依次为5．0，2．5，1．25，0．5，0．125，0．025~g／ml的溶液，并分别进样10txl(n=3)。记录色谱图和峰面积；以青霉素V钾对照品溶液浓度为横坐标，色谱峰面积为纵坐标进行线性回归方程，得回归方程为：A：1667．73C+4．39，r=1．0000。

2．3精密度试验

以同一浓度青霉素V钾对照品溶液(1mg／m1)10txl，在上述色谱条件连续进样6次，青霉素V钾峰面积的RSD为0．21％。

2．4重复性试验

取同一批号样品(20030102)6份，照样品含量测定项下方法操作，分别计算含量。结果RSD=0．52％，重复性良好。

2．5稳定性试验

取同一份供试品溶液，分别于0，1，2，4，8，12h进样测定峰面积RSD=0．46％，表明样品溶液具有很好的稳定性。