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关于孔雀石绿及隐色孔雀石绿在花鲈组织中的分布与消除规律

大C-会员头像-www.bzwz.com标准物质网 大C 0 739 2021-10-19
【摘要】本实验用浓度为0.15mg/mL的孔雀石绿药浴花鲈1h后转移至水泥池中用淡水养殖,研究孔雀石绿(MG)及其代谢产物隐色孔雀石绿(LMG)在花鲈各组织中的分布与消除规律。采用超高效液相色谱串联质谱法快速检测MG、LMG在花鲈的背肌、鱼皮、肝脏的含量,并用内标法来进行定量。结果表明,在消除期间,LMG的浓度始终高于MG的。MG、LMG在肝脏中的浓度最高。MG在花鲈3种组织中的最大浓度由高到低的顺序为:肝脏(94.86±8.12)kg>鱼皮(19.35±1.88)kg>背肌(7.47±0.45)kg。MG在背肌、鱼皮、肝脏中分别于168、960、2160h时检测不到。MG在3种组织中的半衰期长短的先后顺序为:肝脏(7.22d)=鱼皮(7.22d)>背肌(1.44d)。LMG在花鲈3种组织中的最大浓度由高到低的顺序为:肝脏(3607.13±189.56)kg>背肌(103.654-14.97)kg>鱼皮(82.104-7.64)kg。LMG在3种组织中的半衰期长短的先后顺序为:背肌(28.88d)=鱼皮(28.88d)>肝脏(14.44d)。消除2544h后,背肌、鱼皮、肝脏中的LMG含量仍然高于检测限。
  • 孔雀石绿(malachitegreen,MG)是水产养殖中禁用的一种三苯基甲烷类工业燃料,能有效地的防治外部真菌、原虫感染等疾病。孔雀石绿多用于水产动物的繁殖、消毒和运输等环节。但是MG和他的主要代谢产物隐色孔雀石绿(1eucomalachitegreen,LMG)对人体具有致畸、致癌、致突变的“三致”作用。现在MG禁止用于所有动物食品中,但是由于孑L雀石绿抗菌效果好、价格低廉,在水产养殖中仍有违规使用的情况,例如2015年5~6月,国家食品药品监督管理总局抽查水产品中发现鲈鱼等体内MG超标。2015年上海市食药监局第二季度食品安全监督抽检中发现桂鱼和黑鱼体内MG超标,2016年1月广东省食药监局对全省大型餐饮服务单位销售的水产品进行抽检发现桂鱼、黄骨鱼、鲫鱼等MG、LMG超标。这种违法使用禁止兽药的情况导致社会不安等。

    目前,MG在水产动物体内残留消除规律的研究主要集中在鲫鱼(Carassiusauratus)73、大菱鲆(Scophthalmusmaximus)、鳗鲡(A.anguilla)L、草鱼(Ctenopha—ryngodonidellus)…、罗非鱼(Oreochromisspp.)…、中华绒螯蟹(Eriocheirsinensis)t33、虹鳟(Oncorhynchusmykiss)、鲤(CyprinuscarpioLinnaeus)、石斑鱼(Epinephelusawoara)、南美白对虾(Litopenaeusvannamei)、斑点叉尾鲴(IetalurusPunetaus)、杂交鳢(斑鳢Channamaculata早×乌鳢Channaargus6)、鳜(Sinipercachuatsi)“等品种,但是在淡水养殖条件下,孔雀石绿在鲈鱼(Lateolabraxmaculatus)体内的消除情况尚未报道。

    由于人民生活水平的提高,肉质鲜美的花鲈需要量正在增加。但是南方沿海网箱养殖的花鲈不仅种质退化和抗病力降低,而且在盐度为30左右时,生长缓慢,运输花鲈到内地销售费用比较高,所以内陆多地正在进行淡水化养殖花鲈。因此,研究了MG和LMG在淡水花鲈体内的组织分布和代谢规律,为加强该药物的监管及其风险评估提供了理论依据。

    1材料与方法

    1.1材料与仪器

    花鲈平均体重(100.0.4-20.0)g,购买于珠海市斗门镇某养殖场,饲养于中国水产科学院南海水产研究所深圳实验基地的室内水泥池中;甲酸乙腈乙酸铵为色谱纯,美国ThermoFisher公司;实验用水MiliQ超纯水;标准品孔雀石绿、隐色孔雀石绿、氚代孔雀石绿(MG—D)、氚代隐色孔雀石绿(LMG—D)均购自美国Sigma—Aldrich公司,其他试剂为分析纯。

    超高效液相色谱一串联质谱仪美国Waters公司;TDZ5一WS离心机湖南湘仪实验室仪器开发有限公司;超纯水器美国Millipore;研磨仪上海万柏生物科技有限公司;TKAT25匀浆机德国;固相萃取装置美国Supelco公司;CNWpoly—SeryMCX混合型阳离子交换SPE小柱(60mg/3mL)。

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