异菌脲(Iprodione)又名扑海因，是一种高效广谱的二甲酰亚胺类触杀型杀菌剂。主要用于防治葡萄、草莓的灰霉病，马铃薯的早疫病、黑斑病，以及番茄的落叶病与斑点病等真菌病害。近年来异菌脲的市场需求量不断增加，但是大面积和连续使用致使其在土壤中残留量过高，它们不仅对环境造成污染，而且会造成粮食果蔬等农副产品巾的农残升高，通过生物富集作用给食品安全和人类健康带来隐患。

微生物降解以其高效、无二次污染等特点，逐渐成为消除作物中异菌脲残留的主要手段．国内外有关异菌脲降解菌株的报道很少。Athiel等于1995年从法国快速降解异菌脲的土壤中首次分离出一株异菌脲降解菌株Arthrobactersp．MA6，培养7d后能将无机盐培养液中9．90mg／L的异菌脲降解至1．32mg／L。Mercadier等于1997年从施用异菌脲的土壤中分离到3株细菌，分别鉴定为Pseudomonasfluorescens、Pseudomonassp，和paucimobilis，它们联合降解8．25mg／L的异菌脲需要20—24h，Zadra等于2006年分离到鲁氏酵母菌DBVPG6399，培养9d后能够完全降解1mg／L的异菌脲。目前还未见国内关于异菌脲生物降解方面的研究报道。

本研究分离得到一株异菌脲降解菌YJN—G，对其降解特性和代谢途径进行研究，旨在为其在生物修复中的应用提供菌株资源与理论依据。

1材料与方法

1.1培养基与试剂

无机盐培养基(MM,p/gL"):NHNO31.0,KH2PO40.5,K2HPO41.5,NaCl1.0,MgSO47H2O0.2,pH7.0,碳源视实验需要添加，YMM:含有异菌脲的MM培养基。磷酸盐缓冲液:溶液A,71.6g/LNa2HPO412H2O;溶液B,31.2g/LNaH2PO42H2O.38mL溶液A与62mL溶液B混合加水至200mL得到0.1mol/LpH7.0的磷酸盐缓冲液。

LB培养基(p/gL'):酵母浸出物5.0,蛋白胨10.0,NaCl10.0,pH7.0,固体培养基加入15g/L的琼脂。异菌脲母液:异菌脲2.0g溶于100mL丙酮(菌株YJN-G不能利用丙酮生长)。异菌脲(97%):购于江苏常隆化工有限公司;化学试剂(分析纯)购于南京寿德实验器材有限公司;分子生物学试剂购于上海生工生物工程有限公司。