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柴胡始载于《神农本草经》,为伞形科柴胡属植物,按性状不同分别习称北柴胡和南柴胡,其味苦、辛,性微寒,归肝胆经,具有解表退热,疏肝解郁,升举清气之功效。柴胡的化学成分较复杂,迄今为止,已报道其含有皂苷、黄酮、挥发油、甾醇、香豆素、糖类、木脂素、有机酸、多炔类及生物碱等成分,柴胡皂苷是柴胡的主要生物活性成分。
目前对于柴胡皂苷的化学成分研究较为深入,已从柴胡属植物中分离出90多种柴胡皂苷,其中柴胡皂苷a、柴胡皂苷c、柴胡皂苷d含量较高,药理实验证明柴胡皂苷d的活性最为明显。近年来的研究表明,柴胡皂苷d的药理作用较为广泛,包括抗过氧化损伤、抗纤维化、抗炎、抗肿瘤、保肝、镇静及抗癫痫等作用。但目前尚未有柴胡皂苷d对蟾蜍心功能影响的报道,本文观察柴胡皂苷d对蟾蜍心功能的影响,并探讨其影响机制。
健康蟾蜍100只,雌、雄不限,体重110~130g,由川北医学院实验动物中心提供,实验动物许可证编号SYXK(川)2013-076。
盐酸维拉帕米购自上海禾丰制药有限公司,规格:2.5mg/ml,批号:43161001;盐酸肾上腺素购自远大医药(中国)有限公司,规格:1mg/支,批号:161408;艾司洛尔购自齐鲁制药有限公司,规格:0.2g/ml,批号:161204。柴胡皂苷d由中国科学院成都生物研究所李甫博士提供;任氏液由川北医学院机能实验中心配制。
肌张力换能器为四川成都泰盟公司生产,电子天平为上海医用激光仪器厂生产,BL-420生物机能实验系统为四川成都泰盟公司生产,加样枪购自芬兰biohit。
参考文献制备离体蛙心标本。用斯氏法蛙心插管取1只蟾蜍,破坏脑和脊髓,将其背位固定于蛙板上暴露心脏后在左右主动脉下穿一线,将心脏翻至头端,在背面结扎前后腔静脉;在左主动脉下穿一线,距动脉圆锥2~3mm处结扎;再从左右主动脉下方穿一线,打一个活结留作固定插管用。用眼科剪在动脉圆锥前端处向心脏剪一斜口,将盛有林格液的蛙心插管由此口插人心室腔内,连同近旁血管一起结扎固定,将心脏离体;用林格液反复冲洗心室内的余血,至插管内灌流液完全澄清无色后,保持插管内的灌流液1ml,划线作标记。
将蟾蜍心经蛙心夹和丝线与肌张力换能器相连,通过BL-420生物机能实验系统记录离体蟾蜍心心搏曲线。
取60只蟾蜍,分为①空白对照组:依次在蛙心套管中加入0.9、0.1ml林格液;②柴胡皂苷d不同浓度组(实验组):在蛙心套管中分别加入0.9ml林格液和0.1ml终浓度分别为0.0045、0.0090、0.0180mmol/L的柴胡皂苷d;③维拉帕米组:在蛙心套管中同时加入0.9ml林格液和0.1ml的0.0110mmol/L维拉帕米,使维拉帕米终浓度为0.0011mmol/L;④维拉帕米+柴胡皂苷d组:先在蛙心套管中加入0.9ml林格液和0.1ml的0.0110mmol/L维拉帕米,5min后彻底灌洗,再在蛙心套管中加入0.8ml林格液、0.1ml的0.0110mmol/L维拉帕米和0.1ml的0.0700mmol/L柴胡皂苷d;⑤艾司洛尔组:依次在蛙心套管中加入0.9ml林格液和0.1ml的0.12mmol/L艾司洛尔,使艾司洛尔终浓度为0.0406mmol/L;⑥艾司洛尔+柴胡皂苷d组:先在蛙心套管中同时加入0.9ml林格液和0.1ml的0.4062mmol/L艾司洛尔,5min后彻底灌洗,再在蛙心套管中同时加入0.8ml林格液、0.1ml的0.4062mmol/L艾司洛尔和0.1ml0.0700mmol/L柴胡皂苷d,每组10只。用BL-420生物机能实验系统测定每次给药后5min内离体蛙心心肌的收缩力及收缩频率的变化情况,记录蛙心心率和心力峰峰值(表示心肌收缩力的大小)。
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