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第一节 概 述
色谱法与蒸馏、重结晶、溶剂萃取、化学沉淀及电化学沉积法一样,也是一种分离技术,是各种分离技术中效率最高和应用最广的一种方法。
色谱法的最早应用是用于分离植物色素:在一玻璃管中放入碳酸钙,将含有植物色素(植物叶的提取液)的石油醚倒入管中。玻璃管的上端立即出现几种颜色的混合谱带。用纯石油醚冲洗,随着石油醚的加入,谱带不断地向下移动,并逐渐分开成几个不同颜色的谱带,继续冲洗就可分别接得各种颜色的色素进行鉴定。色谱法也由此而得名。
1. 色谱法简介
色谱法是一种分离技术:当流动相中携带的混合物流经固定相时,其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异,与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同,随着流动相的移动,混合物在两相间经过反复多次的分配平衡,使得各组分被固定相保留的时间不同,从而按一定次序由固定相中流出。与适当的柱后检测方法结合,实现混合物中各组分的分离与检测。
试样混合物的分离过程也就是试样中各组分在称之为色谱分离柱中的两相间不断进行着的分配过程。
其中的一相固定不动,称为固定相;
另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体(气体或液体),称为流动相。
2. 色谱法分类
(1) 气相色谱:流动相为气体(称为载气) 分离柱不同:填充柱色谱和毛细管柱色谱; 固定相不同:气固色谱和气液色谱
(2) 液相色谱:流动相为液体 固定相不同:液固色谱和液液色谱。 离子色谱:液相色谱的一种,以特制的离子交换树脂为固定相,不同pH值的水溶液为流动相。
(3)其他色谱方法
薄层色谱和纸色谱:比较简单的色谱方法 凝胶色谱法:测聚合物分子量分布 超临界流体色谱: CO2流动相 高效毛细管电泳: 九十年代快速发展、特别适合生物试样分析分离的高效分析仪器
3.色谱法的特点
(1)分离效率高 复杂混合物,有机同系物、异构体、手性异构体。
(2) 灵敏度高 可以检测出μg.g-1(10-6)级甚至ng.g-1(10-9)级的物质量。
(3) 分析速度快 一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析。
(4) 应用范围广 气相色谱:沸点低于400℃的各种有机或无机试样的分析。 液相色谱:高沸点、热不稳定、生物试样的分离分析。
不足之处: 被分离组分的定性较为困难。
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