氟苯尼考(Floffenic01)又称为氟甲砜霉素，是一种动物专用的广谱抗生素，在酰胺醇类药物中其抗菌活性优于氯霉素及甲砜霉素，特别对一些耐氯霉素及甲砜霉素的大肠杆菌、沙门菌、克雷伯菌仍表现出较高的抗菌活性。氟苯尼考被广泛用于预防或治疗家畜的细菌感染性疾病，主要用于敏感细菌所致的猪、鸡及鱼的细菌性疾病，尤其对呼吸系统感染和肠道感染疗效显著。

近年来，由于抗菌药的大量使用和滥用，动物源性致病菌和环境细菌的耐药率逐渐上升，多重耐药现象也日益严重心。GoniMl在对187株沙门菌的耐药性进行检测时发现，有103株具有多重耐药性。相关研究认为，兽用抗生素的大量使用，不仅影响环境中微生物的数量和功能，而且会使细菌产生耐药性基因并遗传，造成环境生态结构的改变，从而使土壤、水等环境中的耐药细菌种类和数量不断增加。

本试验通过在土壤中添加不同浓度的氟苯尼考，分离培养土壤细菌，采用微量肉汤二倍稀释法测定氟苯尼考对土壤优势细菌的敏感性，同时采用药敏纸片扩散法测定用药前后分离的氟苯尼考敏感菌和耐药菌对18种抗菌药物的敏感性，进而了解氟苯尼考对土壤优势细菌耐药性的影响。

1材料与方法

1．1材料

土壤：采自广东海洋大学校内菜地10～20em的优质土壤。经检测不含氟苯尼考。氟苯尼考：含量98％，华北制药股份有限公司(批号13021322)。药敏纸片：链霉素、阿奇霉素、多粘菌素B、头孢氨苄、头孢唑啉、丁胺卡那霉素、复方新诺明、利福平、多西环素、青霉素、恩诺沙星、氟苯尼考、红霉素、克林霉素、卡那霉素、苯唑西林、大观霉素、呋喃唑酮，杭州驰成医药科技有限公司。培养基：LB固体培养基、LB液体培养基，北京凯欧迪生物科技有限公司。

1．2方法

1．2．1土壤处理与分组

采集的土壤过4mm筛，阴干后按每组2．5kg分装于塑料桶内，共5组，加入氟苯尼考使各组土壤中的药物浓度分别为：I组0mg／kg、II组0．1mg／kg、m组1mg／kg、IVl0mg／kg、V组100mg／kg，每组3个重复。调节土壤含水量至田间最大持水量的50％，用透气纱布覆盖，25oC±3℃的室温下培养。

1．2．2样品的采集

在用药后第14天、28天、56天分别从各组中采集土壤用灭菌蒸馏水进行倍比稀释，制备细菌悬液。具体稀释方法：取10g土壤样品于250mL锥形瓶中，加人90mL灭菌水，震荡摇匀30min后取10mL悬浮液于另一个250mL的锥形瓶中，再加入90mL的灭菌水，以此类推，依次稀释到适宜的浓度。

1．2．3细菌的分离、培养

将上述制备好的不同浓度的细菌悬液各取0．1mL均匀涂布在LB固体培养基上，每组涂10个培养皿，28℃培养48h。观察细菌生长情况。每组挑取60株乳白色、半透明、表面较光滑、边缘整齐、易挑取的中等大小的优势菌落接种到LB液体培养基中，28℃培养24h。

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