大蒜为百合科葱属植物，有丰富的营养成分和药用价值。大蒜公认的功效成分是蒜氨酸酶催化蒜氨酸生成的大蒜辣素及阿霍烯等系列含硫化合物。蒜氨酸酶(Alliinase)又称蒜酶、烷基半胱氨酸亚砜酶，是一种糖蛋白。大蒜含硫化合物的产生是一种酶促反应的结果。因此，蒜氨酸酶的分离纯化方法的研究，对开发利用大蒜类药品、保健品有十分重要的意义。大蒜植株是大蒜加工的副产品，具有较高的蒜氨酸酶含量，是蒜氨酸酶良好的来源。试验探讨了大蒜植株中蒜氨酸酶的提取及纯化条件。

1材料与方法

1．1原料与试剂

蒜苗：市售；考马斯亮蓝G250：联星生物；牛血清蛋白：联星生物；壳聚糖：Solarbio公司，脱乙酰度t>90．0％；其他试剂均为国产分析纯。

1．2主要仪器

JA2003分析天平：上海天平仪器厂；TDZ5一WS湘仪离心机：长沙湘仪离心机仪器有限公司；752紫外一可见分光光度计：上海菁华科技仪器有限公司；恒温磁力搅拌器：天津欧诺仪器仪表有限公司。

1．3试验方法

1．3．1酶活力的测定

根据2，4一二硝基苯肼和丙酮酸及其盐溶液反应，生成2，4一二硝基苯肼丙酮酸盐，利用形成的棕色的2，4一二硝基苯踪在波长420nm处有最大吸收峰推测酶活力。取1mL天然提取的底物，加入1mL蒜氨酸酶液，在试管中反应1min后立即加入等量10％三氯乙酸终止反应，加入1mL1％2，4一二硝基苯肼，25℃恒温5min，然后加入5mL2．5mol／LNaOH，反应10min后于420nm测定OD值(以蒸馏水代替底物为空白)。

1．3．2蛋白质浓度的测定

考马斯亮蓝G一250是一种染色剂，在两种不同酸碱条件下形成红、蓝两种颜色，它在酸性条件下为棕红色，当它与蛋白质通过范德华力结合后，变为蓝色，可在595nm处有最大吸收峰。取0-3mL样品提取液，再加入0．7mL蒸馏水，5mL考马斯亮蓝G一250试剂，充分混合，放置2min后，以标准曲线做参比，在595nm波长下比色，记录吸光度，每组做3个水平。

声明：本文所用图片、文字来源《食品科学》，版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系删除。