棉酚(gossypo1)是从棉籽油里提取的一种成分，过去曾作为一种男性避孕药应用于临床。目前有研究表明，棉酚还具有抑制肿瘤生长的作用。本实验应用棉酚最常用的药用形式醋酸棉酚(GAA)作为研究对象，观察GAA对人舌鳞癌Tca8113细胞形态变化、增殖以及细胞凋亡的影响。

1材料与方法

1．1主要材料

人舌鳞癌Tca8113细胞株(昆明医科大学口腔实验室何永文教授课题组惠赠，购自中科院上海细胞生物库)，醋酸棉酚(美国Sigma公司)，MTT试剂(Solarbio公司)，DMSO(Solarbio公司)，凋亡检测试剂盒(四正柏生物公司)。

1．2方法

1．2．1细胞培养

人舌鳞癌Tca8113细胞培养于含10灭活胎牛血清的RPMI1640培养液中，置37℃、饱和湿度、5CO的培养箱中培养，每2～3d传代一次。

1．2．2GAA对细胞生长作用的影响

取对数生长期细胞调整细胞数为5～8×10个／mL，使用常规MTT法在96孔板中进行，GAA终浓度设置为10t2mol／L、20t~mol／L、40t~mol／L、80timol／L，每组分别设3个平行复孑L，分别培养24、48、72h，每个时间点实验重复3次。

1．2．3GAA对细胞凋亡作用的影响

使用GAA在48、72h的IC。值分别处理Tca8113细胞48、72h，使用AnnexinV—FITC／PI双染法流式细胞术检测GAA对舌癌细胞凋亡的影响。

1．2．4数据统计与分析

采用SPSS13．0统计软件包对数据进行处理。计量资料统计结果以±S表示。依据One—wayANOVA分析，利用Games—Howell法进行两两比较(P<0．05）为差异有统计学意义)。细胞抑制率(%)=(对照组平均A值一实验组平均A值)/对照组平均A值。

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