甘肃某地区奶牛运动场环境中耐药菌流行情况及相关耐药基因检测

甘肃某地区奶牛运动场环境中耐药菌流行情况
及相关耐药基因检测摘要：为了解甘肃某地区奶牛运动场环境中主要耐药性细菌的分布情况及耐药基因的携带情况，试验釆用抗性 平板筛选法分离、纯化耐药菌后再通过16S rRNA鉴定；釆用PCR方法检测6类22种耐药基因携带情况。结果显 示，两年两个奶牛运动场(A和B)分离出不同种属的耐药菌共665株，经16S rRNA PCR鉴定主要为大肠杆菌、屎 肠球菌和普通变形杆菌，其中耐药性大肠杆菌数量最多(398株)，A牛场耐药菌数两年相比增长28. 50%,B牛场耐 药菌数量持平，通过对样品进行10类药物筛选耐药菌结果显示，耐药率前3位的分别为糖肽类(11. 13%,74/665)、 四环素类和磺胺类(10. 98%,73/665)及件内酰胺类和氨基糖昔类(10. 23% ,68/665)。釆用PCR方法对样品进行 耐药基因检测发现，两年两个奶牛运动场的耐药基因携带情况基本相同，唾诺酮类耐药基因qnrB.qnrS的携带率 分别为10.81%和83. 78%,磺胺类耐药基因S“Z1、S点2和S"/3的携带率分别为100%、100%和56.76%,糖肽类 耐药基因VanA .VanB和Va"C的携带率分别为78. 38%、100%和100% ,四环素类耐药基因tetA.tetB.tetC.tetM. tetOaetL 的携带率分别为 100%、100%、100%、100%、81.08%和 75. 68% ,KPC、NDM、aac(6')- I b-cr 耐药基因 的携带率分别为32.43%、29.73%及24.32%,未检出qnrC.tetK.tetW.VIM和OXA耐药基因。携带耐药基因与 GenBank中登录参考株基因序列的同源性为98%?99%。甘肃地区奶牛运动场中耐药菌对常用抗菌药物普遍耐 药且携带相应耐药基因，奶牛运动场中碳青霉烯类及氨基糖昔类耐药基因与上年结果相比数量增加，各相关单位 人员应对其加强奶牛场中耐药菌的监测，临床治疗中应合理用药，以降低环境中耐药菌转移给人类的潜在风险。
关键词：奶牛；运动场环境；耐药菌;分离鉴定；耐药基因
随着传统畜禽养殖业向现代化和集约化转变, 养殖效率提高的同时也造成抗生素用量大大提高。 每年抗生素的生产量达到20万t,其中有40%被用 于畜禽养殖业⑴，但动物机体只能吸收少量抗生素， 大部分会以原药形式排出体外，如果使用含有抗生 素或携带耐药基因的牛粪污水、废水用于还田、灌溉 和堆粪，将会导致环境中其他细菌的耐药性提高，而 细菌所携带的耐药基因扩散速度也会加快⑵。长期 使用将造成动物体内抗生素残留及耐药菌产生，甚 至产生“超级细菌畜禽养殖环境是细菌性耐 药的重要来源之一，动物粪便、污水等可处理后作为 有机肥料应用于农业生产中，为微生物提供天然的 耐药基因库，而在中国动物养殖区由于缺少处理畜 禽粪便的设施会将未处理过的废物直接排放，造成 严重的环境污染问题，大量耐药菌和耐药基因也会 存在于养殖环境中⑴，且在畜禽粪便中含有的耐药 微生物所携带的质粒、转座子等均是抗性基因水平 传播或垂直传播的主要因素，这些耐药微生物可通 过食物链等途径进入人体，给人类健康带来巨大威 胁近年来，在土壤、水等多种环境介质中均检 测到耐药基因的存在，且多重耐药现象严重眾叽 国内不同地区也有大量报道，刘伟杰等对江苏4 个不同地区的耐药菌进行分离，发现17株不同耐药 菌以及多重耐药菌；陈月月等「辺对新疆伊犁地区不 同动物源的大肠杆菌耐药性进行研究发现，鸡源、羊 源、猪源及牛源的大肠杆菌对于临床上常用抗菌药 物均出现不同程度的耐药且最高可达到8重耐药。 甚至在污水中也检测到超级耐药基因如mml、 取Ondm等,将污水处理成饮用水过程中，超级耐药基 因可被转移到人体内