HPLC 测定乳制品中的甲醛含量

摘要﹐针对奶糖及奶制品的甲醛残留问题,建立了一种灵敏、快速和有效的HPLC-UV检测乳制品中甲醛的方法。牛奶和奶粉样品中甲醛经三氯乙酸(TCA)提取,奶糖另添加乙酸锌和亚铁氰化钾进行辅助沉淀,用1 mglmL 2，4-二硝基苯腓(DNPH),在60℃条件下衍生30 min 后,用HPLC-UV分离测定,外标法定量。该方法对3种奶制品平均加标回收率在95%以上,日内精密度和日间精密度在5%以下,甲醛含量在0.03-~4.00 ug/mL.范围内呈良好的线性关系，检出限和定量限分别为0.03 ug/mL和0.10 ug/mL，对常见醛类和醇类有较好的抗干扰性。该方法具有操作简单,准确性高,稳定性好,抗干扰性强的特点,是一种测定乳制品中甲醛的有效分析技术。

关键词   乳制品;甲醛;HPLC

随着乳品工业的快速发展， 乳制品的质量安 全问题越来越受到人们的关注。 2007 年，菲律宾 抽查到 4 款中国生产的奶糖等含乳食品中含有甲 醛，使人们再次聚焦食品中的甲醛问题。 甲醛是一种无色、 有强烈刺激气味的高毒物 质，在中国有毒化学品优先控制名单上位居第二。

甲醛对人的神经系统、 肺、 肝脏均可产生损伤。 2004 年 6 月 15 日国际癌症研究机构（IARC）宣布 甲醛对人类具有致癌性，因此，国家早已明令禁止 在食品中添加甲醛。 近年来大量调查发现许多食 品中都含有甲醛。 研究表明水产品、香菇等农产品 高含量的甲醛并不是因为添加或者环境污染所 致，而是在生长、贮藏和加工过程中在内生性酶等 催化下自然产生[1-8]。 前期工作表明，奶糖主要原 料——奶制品与奶糖加工过程中甲醛形成存在密 切关联。

为了加强对奶糖及其乳制品的质量监管， 迫切需要建立有效的检测方法 目前国内外对于乳制品中甲醛的检测大多参 照水产品或是香菇中的甲醛检测方法[9-16]，包括分 光光度法、LC、GC-MS、 流动注射分光光度法，也有使用硝酸银显色法[17]、间苯三酚法、酚酞-亚硫 酸钠法[18]、三氯化铁-盐酸显色法[19]和罗丹明-硫酸 钾比色法[20]检测。 各方法之间的差异主要在于甲 醛提取方法和检测仪器不同。

对于甲醛的提取方 法，目前采用较多的是国标水蒸气蒸馏法，然而高 温加热蒸馏过程中会导致某些食品中甲醛含量的 变化，影响检测结果。 另有报道采用直接提取法， 即用水[21]或是水-乙腈混合液[22]提取。 由于食物样 品基质的复杂性， 该提取液也不能完全满足检测 要求。

对于甲醛的检测，大多用分光光度法或是一 些显色法，这些方法检出限较高，容易受到干扰， 而 HPLC、GC-MS 等检测方法快速、准确，但对前 处理要求较高。 本研究旨建立一种准确、高效、抗 干扰性强的乳制品甲醛检测方法， 为奶糖及其乳 制品等产品的质量检测提供有效的技术支持。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器 试剂：2，4－二硝基苯肼（分析纯），上海化学试 剂公司；乙酸锌（分析纯），上海化学试剂公司；亚 铁氰化钾（分析纯），上海化学试剂公司；三氯乙酸 （TCA）（分析纯）， 杭州汇普化工仪器有限公司； NaOH（分析纯），上海化学试剂公司；甲醛标准溶 液（100 mg/L），国家环保总局；甲醇（色谱纯），TEDIA公司;乙腈(色谱纯) , TEDIA公司;试验所用的水均为超纯水;试验所用的奶糖﹑奶粉和牛奶，分别购于杭州市物美、乐购等大超市。

试验仪器:安捷伦1100高效液相色谱仪(配有紫外检测器和Rev.A.06.03色谱工作站)，美国安捷伦公司;Agilent ODS2-C18柱(4.6 mm×200mm ,5 um),美国安捷伦公司;高速冷冻离心机,德国Sigma公司;K-100型超声仪,昆山市超声仪器有限公司;DKS-12型电热恒温水浴锅，上海经济区海盐中新电器厂;WII-866型旋涡混合器,太仓市科教器材厂;DHC-9140A 电热鼓风干燥箱,上海一恒科技有限公司。

1.2试验方法

1.2.1样品前处理

1.2.1.1固体样品 奶粉:称取5.00 g 试样至100 mL具塞三角瓶