近年来，农业部不断推进农产品质量安全风险评估工作。自2011年12月农业部启动实施了国家农产品质量安全风险评估计划以来，已在全国范围内规划建设了包含1个国家农产品质量安全风险评估中心，100个部级风险评估实验室以及145个风险评估实验站在内的风险评估体系。随着农产品质量安全风险评估工作的不断深入，对风险评估实验室的检测能力、监测与评估结果的准确、可比、可溯源等方面提出了更高要求。针对农产品质量安全风险监测与评估工作中的重点参数，配备相应的有证标准物质，对确保风险监测与评估结果的准确可靠显得至关重要。然而，我国可用于农产品质量安全风险评估与监测的有证标准物质种类稀缺、数量有限，标准物质研制与储备工作严重滞后，这对我国农产品质量安全风险评估与监测实验室检测结果的可比性和可溯源性将会产生一定的制约与影响。

有证标准物质（ Certified Reference material, CRM）是指附有证书的标准物质，其一种或多种特性值用建立了溯源性的程序确定，使之可溯源到准确复现的用于表示该特性值的计量单位，而且每个标准值都附有给定置信水平的不确定度。国际计量局（BmPM）针对标准物质纯度定值的推荐方法主要有质量平衡法（MB）29、示差量热扫描法（DSC）W6、定量核磁法（qNMR）。其中质量平衡法是一种间接的纯度测定方法，通过对有机杂质、水分、无机杂质等的测定来间接得到主成分的准确纯度。而示差量热扫描法和定量核磁法是直接的纯度测定方法。尤其是定量核磁法，通过选择合适的、纯度较高的有证标准物质作为内标物，可以将测量结果直接溯源到SI单位叫。

本研究依据中华人民共和国农业部公告第235号《动物性食品中兽药最高残留限量》和第560号《兽药地方标准废止目录》等，以及风险评估与专项监测的重点与急需参数，根据国家一级标准物质技术规范等相关技术文件①-1，首先开展了甲醇中甲硝唑、替硝唑、氯霉素、恩诺沙星、诺氟沙星、氟苯尼考等6种抗菌药物（结构式见图1）溶液标准物质的研制。实验中，采用质量平衡法与定量核磁法两种不同原理的方法对固体纯品纯度定值，重量一容量法配制溶液标准物质，并对6种溶液标准物质进行了均匀性检验、半年稳定性监测以及不确定度的评估。

材料与方法

（一）实验材料

1.主要仪器设备。高效液相色谱仪（LC-20A，日本 Shimadzu公司）；卡尔费休水分滴定仪TOLEDO DL39，瑞士 Mettler公司）；热重分析仪（ ParisI，美国 PerkinElmer公司）；核磁共振仪器（ Avance II，德国 Bruker公司）；分析天平（AL104，瑞士 Mettler公司）；红外光谱仪（德国Bruker公司）；质谱分析仪（美国 Agilent公司）。

2.主要试剂材料。甲硝唑、替硝唑纯品原料（上海江南结公司）；氯霉素、氟苯尼考、恩诺沙星、诺氟沙星纯品原料（日本TCⅠ公司）；尼泊金乙酯标准物质（GBW（E）100064）（中国计量科学研究院）；氘代甲醇（美国 Sigma- Aldrich公司）；其他有机溶剂均为色谱纯（德国Merk公司）。

（二）实验方法

1.定性分析。针对标准物质原料的定性分析，分别釆用红外光谱法和质谱法进行鉴定与确认。红外谱图测定结果，通过与美国国家标准技术研究院（NST）等权威研究机构发布的标准红外谱图比对，来确认样品的主要成分。其次，利用质谱测定结果与样品的理论分子离子峰对照，进一步确认样品成分，完成对标准物质原料主成分的初步定性工作。

2.纯度定值。分别采用质量平衡法与定量核磁法对纯品原料的纯度进行定值。质量平衡法（ Mass balance,MB）通过液相色谱法测定主成分与有机杂质、卡尔费休测定水分、顶空气相色谱法测定挥发性杂质及热重分析法测定非挥发性杂质来间接计算主成分纯度，纯度定值见公式（1）。
P=P×（100%-X.X-X）×100%（1）