高效液相色谱仪色谱柱的污染的直接表现是色谱峰形变差、展宽、不对称、拖尾还有柱效下降等，进而影响色谱数据的准确性。导致色谱柱不能再继续使用的主要原因是长期使用过程中，样品中强保留物质逐渐在色谱柱中积累造成的，情况严重的直接造成色谱柱报废。为延长色谱柱的使用寿命，常用到的方法是色谱柱再生。

高效液相色谱柱的再生就是对在正常使用过程中，被严重污染而常规清洗方法不能有效清除出污染杂质的色谱柱进行再处理，从而达到去除污染物，明显提高色谱柱各项性能指标，使之恢复可继续使用状态的一系列清洗过程。

色谱柱再生方法主要是根据固定相来选择，根据不同固定相选择的方法如下（一般情况）：

反相柱：分别用甲醇：水＝90：10、纯甲醇、二氯甲烷等溶剂着流动相，依次冲洗，每种流动相流经色谱柱不少于20倍的色谱柱体积。然后再以相反的次序冲洗。

正相柱：分别用正己烷、异丙醇、二氯甲烷、甲醇等溶剂做流动相，顺次冲洗，每种流动相流经色谱柱不少于20倍的柱体积（异丙醇粘度大，可降低流速，避免压力过高）。注意使用溶剂的次序不要颠倒，用甲醇冲洗完后，再以相反的次序冲洗至正己烷。所有的流动相必须严格脱水。

当然，以上只是说一般的反相色谱柱的再生方法。随着反相键合技术的发展，常规的C18色谱柱由于固定相和键合相的差异，也有其他的再生方法。如下图（Chromcro C18）

那我们什么时候需要再生呢？这里就需要我们每一个液相工作者都要养成一个好习惯，即随时记录色谱柱压力的习惯，时刻关注色谱柱压力变化，从而做出正确的判断。