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聚合酶链式反应(PCR)是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。只要能分离出一丁点的DNA,就能用PCR加以放大,进行比对。这个技术应用到食品安全检验,相对于传统微生物检测技术,PCR技术的优势非常明显,可以针对特定生物体外的特定DNA序列进行快速扩充,从而简化了检测流程,提高了检测效率。
1.检测前需要利用PCR的扩增特异性设计引物,引物设计直接影响到检测结果;引物设计前一定要做好检测对象的遗传背景分析。
2.模板制备前,检测食品样本的模板纯度与分子数的要明确;模板制备的过程中需要尽可能地将样本中存在的PCR抑制因子去掉,也要将DNA蛋白与有机溶剂移除,尽可能地提高模板制备的质量。
3.检测过程中的污染问题,操作过程需要无菌控制,但检测工作的需要勤换枪头,确保在检测过程中不会出现交叉污染或者是样品被污染的情况,从而最大程度地保证检测结果的客观性和准确性。
4.要保证检测对象的生物活性,因为PCR技术在检测过程中是针对DNA进行检测的,而不是使用活细胞进行检测的;是否保持生物活性会影响检测结果,却不会影响检测过程,并且此种技术本身也无法区分细胞的死活;但是检测对象无法保持生物活性,必然会对检测结果造成很大的影响。
PCR是一种比较先进的检测技术,在微生物检测领域得到了比较广泛的应用,在食品安全质量检测方面也取得了不错的效果。但是需要不断探索新的检测技术,进一步拓展应用领域,使其在食品安全质量检测中发挥更大的作用。
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