增塑剂 食品中邻苯二甲酸二丙酯和邻苯二甲酸二丁酯的四种免疫分析检测方法

食品中添加塑化剂是消费者对邻苯二甲酸酯(PAEs)的密切关注。PAEs 被广泛地应用于工业生产和消费品市场中，在产品的生产、使用、处理过程中，PAEs 可能会随之进入环境和食品中。PAEs 是一类环境激素，能通过产生类似激素的作用干扰器官的正常生长和发育。因此，邻苯二甲酸酯的研究具有重要的现实意义。近年来的免疫分析方法具有高特异性、线性范围宽和简单快速等优点。下面介绍四种免疫分析方法

一、采用重氮化法

原理是将半抗原 4-氨基邻苯二甲酸二丙酯(DPrAP)与载体蛋白质(BSA，OVA)结合制备了人工抗原；将半抗原 DPrAP 与 BSA结合物作为免疫抗原，免疫动物获得终点效价为 1:128,000 的多克隆抗体，抗体的交叉反应率均低于 13%；制备并获得了高特异性的抗体；然后将半抗原 DPrAP 与 OVA 结合物作为包被抗原，进行免疫分析实验。

二、用 HRP 标记邻苯二甲酸二丙酯全抗原(DPrAP-OVA)

原理是采用抗体包被酶标板，建立了直接竞争酶联免疫分析法(dc-ELISA)测定食品包装材料中的 DPrP；在多功能酶标仪上检测490nm 处的吸光度值；最低检测限为 0.01 ng/mL，线性范围为 0.01-16 ng/mL；对四种样品中的 DPrP 含量进行了检测。

三、利用化学发光反应

原理是采用 HRP 标记全抗原(DPrAP-OVA)为检测探针，抗体包被酶标板，建立了直接竞争增强化学发光酶联免疫分析法(CL-ELISA)快速测定食品中的 DPrP；在多功能酶标仪上测定化学发光强度值；最低检测限为 0.03 ng/mL，线性范围为 0.03-500 ng/mL；对六种样品中的 DPrP 含量进行了检测。

四、采用一种新型的荧光标记物氟硼二吡咯衍生物(BODIPY)标记抗体

原理是抗原包被酶标板，建立了直接竞争荧光免疫分析法(dc-FIA)测定食品中的 DBP；在多功能酶标仪上测定激发波长为 485nm, 射波长为 528nm 时的荧光强度；最低检测限为 0.001 ng/mL，线性范围为 5.7×10-3-1.1×103 ng/mL；对三种样品中的 DBP含量进行了检测。

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